TINCIÓN DE PAPANICOLAOU
El proceso de fijación es indispensable antes de pasar a la tinción de la muestra:
La FIJACIÓN es aquel paso en el que la muestra ya extendida adquiere una conservación gracias al agente fijador que utilicemos. El agente fijador por excelencia en la prática citológica es el alcohol a 96º ya que éste penetra en las células haciendo que estas se conserven y no permitan su degradación natural (ya que dejan de ser parte de un tejido) y permite que su estudio al microscopio ser certero y fidedigno.
Otros agentes fijadores:
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Alcoholes de otras graduaciones (eter)
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Nebulizadores-Spray.
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Secado al Aire.
Extensión
Fijación
La Técnica de Tinción.
Las células extraídas de los epitelios planos y glandulares naturalmente no poseen un color específico... es por eso que se emplea una técnica para ''colorearlas''.
Esto para que el estudio citológico sea sencillo y logremos apreciar la morfología de cada tipo celular.
La Tinción de Papanicolau es un método de tinción policrómico con el que se busca obtener contraste entre el núcleo y el citoplasma de las celulas; consiste en introducir las laminillas, de una manera secuencial y por tiempo predeterminado, en diferentes soluciones que incluyen: agua, alcohol etílico a diferentes concentraciones, colorantes, acetona y xilol con el propósito hidratar las células y prepararlas para la tinción, colorear los componentes celulares y facilitar la observación al microscopio.
Y ¿Por qué de Papanicolaou?
Simplemente porque George N. Papanicolaou (padre del citodiagnóstico) fue quien creó este método, es por eso que lleva su apellido.
La Tinción de PAP. permite:
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Una buena definición del componente nuclear la cromatina, así como su patrón y disposición.
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Un aspecto diferente en los citoplasmas dependiendo del grado de maduración, acción metabólica y hormonal.
El proceso de tinción consta de tres etapas fundamentales y tres colorantes esenciales.
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Etapa de tinción nuclear.
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Etapa de tinción citoplasmática.
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Etapa de aclaramiento.
EA 50
HEMATOXILINA
oRANGE G(6)
fundamento de la tinción de pap.
Coloración Ácida
Son compuestos de anión coloreado y la base incolora. Son derivados de grupos sulfónicos, carboxilos o hidroxilos fenólicos. Tienen preferencia por sustancias básicas, sobre todo estructuras proteicas localizadas en el citoplasma celular y también por el colágeno de la matriz extracelular.
Como ejemplo tenemos a la Eosina y el EA50
Coloración Básica
Son un tipo de amina, aporta el color, mientras que la parte ácida es incolora. Es decir, con colorantes catiónicos. Tienen preferencia por las sustancias ácidas del tejido, como el ADN o ciertos componentes de la matriz extracelular como los glicosaminoglicanos.
Como ejemplo encontramos a las Hematoxilinas.
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Acción del Orange G
Acción de la Hematoxilina
Acción del EA50
TREN DE TINCIÓN DE PAPANICOLAOU.
Procedimiento simplificado
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Te invitamos a ver el video realizado por Biopack Productos Químicos
en donde utilizan sus productos para realizar la tinción de Papanicolaou.
https://www.youtube.com/watch?v=K0Gs_oSJEz0&list=LLMp6YxuxtFagotfp7Y9nxSQ&index=2&t=0s